提供者:上海威正翔禹生物科技有限公司 發布時間:2020/7/16 閱讀次數:102次 進入該公司展臺
細胞生長緩慢
細胞變形
碎片增加
懸浮細胞容易成團
培養基提前變色
鏡下發現有小黑點
如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染……原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細胞可能出現了支原體污染。據報道,細胞培養中發生支原體污染的機率較高,會達到70%左右,常規抗生素的使用對支原體幾乎無效。
那么,支原體污染,對細胞培養有什么危害呢?
支原體穿透真核細胞表面 大量支原體聚集在真核細胞表面(掃描電鏡照片)
細胞被支原體污染,解決方案
方法一:確認細胞已被支原體污染,終止試驗,丟棄所有被污染的細胞和耗材。
重新復蘇細胞,注意選用未被污染的細胞株、血清和培養基,并規范操作。
方法二:對于珍貴的,樣品不可再得的細胞,或價格昂貴的種子細胞,不但無法丟棄,而且作為種子細胞,還需要徹底根除支原體污染。
此時,需選用特異性的支原體殺除劑,清除污染,保護細胞。
目前世界上有效的方法是是德國的一款生物試劑,由Minerva公司生產,品名Mynox®。
此試劑可在2-3小時內將支原體主動殺除,但對細胞無毒害作用。特別適合細胞保種。
Mynox®為枯草桿菌中提取出的生物制劑,加入培養液中,可特異性地與支原體膜結合,改變膜通透性。通過此生物物理的方法,2~3小時內,即可把細胞中的支原體殺除掉。因為細胞膜結構與支原體膜不同,故Mynox®不會與細胞膜結合,因此無細胞毒性。
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